• VousLe corps humain abrite de nombreuse bactéries, levures et virus. C’est pourquoi vous devez vous laver les mains avec du gel hydroalcoolique et utiliser si possible des gants et un masque.
• L'airL’air ambiant est rempli de contaminants, et à chaque mouvement ou respiration, la masse d’air déplacée créée un risque pour votre culture! Evitez de tousser ou d'expirer en direction de votre matériel lorsque vous effectuez une manipulation.
• Le substratLa contamination est souvent due à une mauvaise stérilisation du substrat. Les durées de stérilisation sont différentes selon les matériaux utilisés.
• Le matérielTout ce que vous allez toucher durant la manipulation doit être soigneusement désinfecté à l'eau de javel, à l’alcool 70° ou stérilisé à la flamme (pour les objets en métal comme les scalpels ou les aiguilles des seringues).
• L'inoculumL’inoculum utilisé pour inoculer le substrat (que ce soit une culture liquide de mycélium, une seringue de spores ou un morceau de tissu) peut être une source de contamination s'il n’a pas était soigneusement préparé.
• Les contaminants mobilesToute les petites bêtes comme les mouches, les mites, les fourmis et autres insectes éventuellement présents peuvent être un vecteur potentiel de contamination.
Désinfectez le plan de travailAvant toutes manipulations commencez par vaporiser de l'eau de javel (diluée à 10%) ou de l'alcool à 70° sur votre plan de travail. (attention n'utilisez pas d'alcool si vous utilisez une gazinière ou un bec bunsen!)
Enlevez vos bijouxPensez à retirer vos bagues, montres et bracelets qui peuvent être des sources de contaminations.
Lavez-vous les mainsUtilisez un gel hydroalcoolique ou de l'alcool à 70° pour vous laver les mains et les poignets avant de manipuler le matériel ou utilisez des gants (aussi nettoyés à l'alcool)
Evitez les courants d'airFermez les fenêtres et essayez, lors de vos manipulations, de faire des gestes brefs et précis afin de limiter au maximum le mouvement d'éventuels contaminants en suspension dans l'air.
Attention à votre respirationRespirez doucement et n'expirez pas en direction du matériel, ou mieux utilisez un masque.
Restez dans le cône de stérilitéLa flamme d'un bec bunzen créée théoriquement un "cône de stérilité" de 10cm autour d'elle. Ce cône est de 5cm pour une lampe à alcool. Vous devrez effectuer vos manipulations le plus près possible de la flamme (sans vous bruler). Vous pouvez utiliser plusieurs lampes à alcool pour augmenter cette zone stérile.
Humidifiez l'airEn faisant bouillir de l'eau pendant une petite demi-heure, vous pouvez humidifier l'air ambiant et ainsi faire retomber toutes les particules en suspension. Ainsi, les manipulations sont réalisées dans de meilleures conditions d'asepsie.