Développer du mycelium sur des céréales en 6 étapes.


Il existe de nombreuses méthodes pour coloniser des céréales à partir de spores ou de mycélium
La méthode avec seringue est simple et respecte les nécessités de stérilité des transferts
L'inoculation avec du mycélium sur agar-agar est plus suceptible de contamination

MATERIEL NECESSAIRE

  1. Un bocal avec couvercle stérilisables
  2. Une céréale (blé ou orge ou riz brun, ...)
  3. Du perlon (ouate synthétique)
  4. Une cocotte-minute
  5. Une seringue de spores ou de mycélium
    6. ou un morceau d'agar-agar colonisé

Nota: Selon la céréale utilisée le volume final sera 2 à 3 fois le volume initial.
Remplir un quart du volume du bocal en céréales.

Step 1: Hydrater les grains par trempage

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Verser les céréales dans un récipient et les couvrir largement d'eau.
Laisser tremper pendant 12 à 24h.  

Step 2: Fabriquer un couvercle spécial

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Pendant que les grains s'hydratent, fabriquer le couvercle:

Percer un trou au centre de 5 à 10 mm
Ce trou central servira de filtre en le garnissant de perlon
Il permettra au mycélium de "respirer"

Si on veut procéder à l'inoculation avec une seringue:
Percer un deuxième trou plus petit et plus près du bord.
Ce trou sera bouché avec du silicone.
Il permettra l'inoculation des céréales avec la seringue

Step 3: Faire bouillir puis égoutter les céréales

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Faire bouillir les céréales pendant 15 minutes.
Egoutter les céréales pendant une heure.
Elles ne doivent plus être brillantes d'humidité.
Remplir le bocal de 2/3 à 3/4.

Step 4: Stériliser

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Recouvrir les bocaux de papier alu pour éviter une entrée d'eau.
Les placer dans la cocotte-minute.
Stériliser pendant 45 mn minimum.
Laisser refroidir pendant une nuit.

Step 5 : Inoculer

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Inoculer avec une seringue de spores ou de mycelium.

Avant l'inoculation nettoyer le silicone avec de l'alcool.
Porter l'aiguille au rouge avec un briquet et laisser la refroidir
30 secondes avant l'inoculation.

Si l'inoculation est réalisée avec un morceau d'agar-agar colonisé:
se placer dans un environnement propre
ouvrir rapidement le bocal et introduire l'agar-agar avant de refermer.

Step 6: Colonisation

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Une fois inoculés placer les bocaux à 20 à 25°C à l'abri de la lumière

Vérifier régulièrement qu'aucune contamination n'apparait.
Les contaminations sont en général de couleur verte ou marron

Les bocaux devraient être colonisés en une à deux semaines
Ils seront utilisés pour coloniser le substrat de fructification